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紫外吸收法测定蛋白质浓度的基本原理及优缺点

 更新时间:2022-06-29 点击量:7950

原理:蛋白质分子中常含有酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯环结构,在紫外280nm波长处有最大吸收峰,其光吸收值与蛋白质浓度成正比,故可以用280nm波长吸收值大小来测定蛋白质含量。
优点:
1.快速;
2.对蛋白质无破坏性。
缺点:
1.不是严格的定量方法。因为此法是根据酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)残基的强吸收值来测定的,不同的蛋白质具有不同的消光系数。另外,当蛋白质分子中不含Tyr、Phe或Trp残基时,该方法就不能检出蛋白。(此法用于测粗提总蛋白浓度较为适宜)
2.核酸可引起强烈干扰。